发布日期：2024-03-09 07:46 点击次数：89
多酚类化合物是平常存在于植物中的次级代谢居品，具有渊博的抗氧化、抗软弱、抗菌、抗癌、降血脂和提高机体免疫力等功能。单 宁又称单宁酸或鞣酸，是中高度团员的多酚类化合物，可分为水解单宁和缩和单宁，两者常共存于植物组织中。 水解单宁能被酸、碱和特定的酶水解,是由葡萄糖和没食子酸或鞣花酸酿成的多元酯类化合物，包括没食子酸吡喃葡萄糖、没食子单宁、鞣花单宁及它们的滋生物。覆盆子为蔷薇科悬钩子属植物华东覆盆子（Rubus chingii Hu）的未熟识干燥果实，含有丰富单宁类化合物，约占总多酚的75%。但覆盆子单宁经胃肠说念消化后的褂讪性、活性变化过甚对肠说念菌群的退换作用尚不解确。
江西师范大学生命科学学院贾晓燕、胡一又一又、张 露*等从覆盆子中索求富集单宁，通过体外模拟消化模子探究覆盆子单宁富集组分消化前后单宁含量及抗氧化活性、α-葡萄糖苷酶贬抑活性变化，通过体外厌氧发酵模子分析模拟消化对其肠说念菌群退换作用的影响，终末接收超高效液相色谱-四极杆漂荡时刻串联质谱法（UPLC-ESI-QTOF-MS/MS）比较体外消化和酵解居品中单宁构成过甚代谢居品含量变化情况。
1.模拟胃肠说念消化后覆盆子单宁富集组分水解单宁含量变化
覆盆子单宁组分经胃肠说念模拟消化后的可水解单宁含量变化如表1所示。覆盆子单宁经胃模拟消化后，FGE组和FG组的可水解单宁含量较FY组显耀增多（ P ＜0.05 ），分离增多了125.04%和103.73%，且两组间具有显耀性各异（P＜0.05）。 在胃消化经过中，消化酶和pH值环境均会影响样品中可水解单宁的褂讪性，且pH值影响更大，水解单宁在酸性条目下会水解因素子质料较低的没食子单宁和鞣花单宁。 经肠说念模拟消化后，FIE组和FI组的可水解单宁含量较FGE、FG两组显然下落，分离下落了56.24%和66.24%（P＜0.05），标明在肠说念消化经过中，覆盆子中可水解单宁的褂讪性同期受消化酶和pH值环境的影响，但受消化酶的影响较小。综上，覆盆子单宁经胃肠说念模拟消化后，其含量天然在胃消化阶段会显耀增多，但肠消化阶段却阐扬为显耀下落，标明胃肠说念消化经过会影响可水解单宁的褂讪性，使其含量减少。
2.模拟胃肠说念消化后覆盆子单宁富集组分DPPH摆脱基、ABTS阳离子摆脱基断根智力
皇冠手机体育网皇冠客服飞机：@seo3687覆盆子单宁及经胃肠说念模拟消化后样品的DPPH摆脱基、ABTS阳离子摆脱基断根智力如图2和表1所示。整个样品的DPPH摆脱基断根智力均跟着样品性量浓度的增多而增强，FY的DPPH摆脱基断根智力最弱（ IC 50 ＝63.57 µg/mL），FGE、FG、FIE和FI的DPPH摆脱基断根智力邻近，为FY组的1.60～2.18 倍，胃肠消化经过会显耀增强覆盆子单宁的DPPH摆脱基断根智力（P＜0.05）， I C 50 为 为29.15～39.65 µg/mL，可能是因为覆盆子单宁胃消化经过中含量飞腾，导致其抗氧化活性增强。另外，整个样品均具有较好的ABTS阳离子摆脱基断根智力，且在质料浓度低于130 µg/mL时具有渊博的剂量-效应关系，但原样与消化样品间的ABTS阳离子摆脱基断根智力无显然各异，IC 50 为26.49～31.22 µg/mL，标明胃肠说念模拟消化对覆盆子单宁的ABTS阳离子摆脱基断根智力无显然影响。
3.模拟胃肠说念消化后覆盆子单宁富集组分的α-葡萄糖苷酶贬抑智力
覆盆子单宁过甚胃肠说念模拟消化样品的α-葡萄糖苷酶贬抑智力如图3和表1所示，FIE组（IC50＝77.66 µg/mL）和FI组（IC50＝85.18 µg/mL）的α-葡萄糖苷酶贬抑智力较弱，而FY、FGE和FG则具有渊博的α-葡萄糖苷酶贬抑智力，IC50分离为10.84、6.38、5.83 µg/mL，经肠说念模拟消化后，样品的α-葡萄糖苷酶贬抑智力显然缩短。以上效劳标明，样品经胃模拟消化后，其贬抑智力有所培植（P＜0.05），pH值的影响大于消化酶，这可能是由于在胃消化阶段，pH值环境发生改造，单宁含量增多，而经肠说念模拟消化后，由于环境pH值再次发生变化，可能导致部分单宁异构化或降解为α-葡萄糖苷酶贬抑智力更差的因素，使样品的酶贬抑活性大幅下落。
4.体外发酵粪便样品的高通量测序效劳
测序质料
立时抽取FY-CF、FI-CF、FIE-CF、FKI-CF、BK组样品所测得的序列，统计其所代表的操作分类单位（OTU）数目，并以序列数与OTU数目绘图稀释弧线，效劳如图4所示，整个样品组的物种数随序列数的增多而增多，当序列数达30 000后，稀释弧线逐渐趋于平坦，讲明本次测序数据量迷漫响应肠说念菌群的各样特性况，迷漫体现肠说念菌群中大部分的菌群构成情况。
菌群各样性及构成因素分析
证实图4中微生物的OTU数目对样品进行 α 各样性分析，如表2所示，各样品的Coverage指数均大于0.999，标明本次测序方法和数据不错响应肠说念菌群的真确构成。FKI-CF、FI-CF和FIE-CF组的Shannon、Simpson、Ace和Chao指数比较于FY-CF组有显耀性各异（ P ＜0.05），讲明未消化的和消化后的覆盆子单宁均会对肠说念菌群的各样性产生影响。FI-CF、FIE-CF和FKI-CF比较较，Simpson指数具有显耀性各异，讲明消化经过中的酶、pH值、消化液会影响覆盆子单宁活性，从而影响肠说念菌群的丰采。
为比较微生物群落之间的各异，本执行进行了 β 各样性分析和主因素分析。由图5可知，FI-CF、FIE-CF、FY-CF、FKI-CF和BK组之间两两分开集聚且各异显然，讲明覆盆子单宁会影响肠说念微生物群的构成结构。
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肠说念菌群结构和组因素析
各样品基于门水平上的物种构成及相对丰采如图6A所示。5 组样品的肠说念菌群均以厚壁菌门（Firmicutes）、拟杆菌门（Bacteroidetes）、放线菌门（Actinobacteriota）和变形菌门（Proteobacteria）为上风菌门，其中BK组上述4 个上风菌门相对丰采分离为47.68%、31.94%、11.16%、8.01%。与BK组比较，覆盆子单宁经模拟消化后Firmicutes相对丰采增多（38.20%），Actinobacteriota、Bacteroidetes和Proteobacteria的相对丰采分离缩短24.44%、63.12%、69.88%，未消化的FY-CF组除Actinobacteriota的相对丰采（15.95%）增多外，其他上风菌门的相对丰采变化趋势与消化后的覆盆子单宁组一致。另外，厚壁菌门中含产丁酸菌，讲明覆盆子单宁可促进丁酸的产生。
各样品基于属水平上的物种构成及相对丰采如图6B所示。在属水平上相对丰采排前15的菌属包括不动杆菌属（Agathobacter）、拟杆菌属（Bacteroides）、双歧杆菌属（Bifidobacterium）、粪便杆菌属（Faecalibaterium）、布劳特氏菌属（Blautia）、瘤胃球菌属（Ruminococcus）、厌氧原体属（Asteroleplasma）、巨单胞菌属（Megamonas）、Dorea、Alistipes、产气柯林斯菌属（Collinsella）、类杆菌属（Parabacteroides）、Parasutterella和丁酸弧菌（Anaerostipes）。相对丰采前5的Agathobacter、Bifidobacterium、Faecalibaterium、Blautia、Ruminococcus在FY-CF、FI-CF、FIE-CF和FKI-CF组中相对丰采均高于BK组，其中Agathobacter和Faecalibaterium具有显耀性各异（P＜0.05），而Bacteroides相对丰采则显耀低于BK组（P＜0.05）。Faecalibaterium在FY-CF、FI-CF和FIE-CF组中的相对丰采分离较BK组增多1.81%、6.32%和6.45%（图7C）。动作益生菌的Bifidobacterium其相对丰采在单宁样品组中均高于BK组（图7B）。FI-CF、FIE-C和FKI-CF组中Ruminococcus的相对丰采比较BK组增多0.68%、1.21%和3.06%，而在FY-CF组中缩短0.74%（图7D），讲明经过消化后的单宁组分更有助于Ruminococcus增殖，揣度可能在消化经过中单宁组分产生新的能被Ruminococcus期骗的物资。与BK组比较，Anaerostipes在FY-CF组相对丰采增多2.08%，在FI-CF、FIE-CF组平分离增多0.72%和2.38%（图7A）。此外，咱们还发现单宁富集组分显耀增多了Coprococcus的相对丰采，FY-CF、FI-CF和FIE-CF组中Coprococcus的相对丰采比较BK组分离增多1.24%、0.63%和1.07%（图7E）。以上有计划效劳清楚，覆盆子单宁对东说念主体肠说念菌群中有意菌的丰采和各样性均有显耀的促进作用，而比较未消化的覆盆子单宁，消化后的覆盆子单宁对肠说念菌群中有意菌滋长的影响较小，讲明胃肠说念消化经过会影响覆盆子单宁的活性，从而影响其在东说念主体内阐扬作用。
5.覆盆子单宁胃肠消化褂讪性及肠酵解特点
博彩平台用户协议通过将得到的母离子、离子碎屑的准确分子质料以及它们的特征碎屑模式与参考文件、Scifinder和Metlin数据库中记载的数据进行匹配，对化合物的结构进行浮滑，以母离子的峰面积动作参照默示不雷同品之间单宁代谢物相对含量的变化。覆盆子单宁富集组分（FY）和体外结肠发酵后（FY-CF）两个样品的总离子流图如图8所示，浮滑的化合物信息如表3所示。在FY中检测到了8 种单宁类化合物，其中峰1、8、12、13和18的母离子疏导，[M－H] － 为 m / z 633.072 4，具有特征碎屑 m / z 463.044 6（[M－H－170] － ）、 m / z 301.001 7（[MH－332] － ），标明存在没食子酸（ m / z 301）、六羟基联苯二甲酰基（HHDP）和葡萄糖基部分（ m / z 463.044 6），推断为没食子酰基六羟基联苯二甲酰基葡萄糖或其异构体；峰2、14、15、17、22、26和30推断为赤芍素/木麻黄鞣宁异构体，[M－H] － 为 m / z 783.071 6，欧博真人平台二级碎屑 m / z 481.056 9为母离子失去1 个HHDP基团所产生，碎屑 m / z 300.998 0为[HHDP－H] － ；峰5、27、32、34和37也具有疏导的母离子，[M－H] － 均为 m / z 935.085 4，揣度二级碎屑 m / z 633.0823和 m / z 300.996 8为木麻黄鞣宁（C 41 H 28 O 26 ）过甚同分异构体；峰7、20和29（ m / z 1 103.092 1、 m / z 1 103.091 1、 m / z 1 018.523 3），均具有特征碎屑 m / z 633.073 7，推断为缩合单宁类化合物；峰4、31和38（ m / z 467.037 1）的母离子疏导，具有二级特征碎屑 m / z 300.995 1，推断为鞣花酸滋生物；推断峰23和25为鞣花酸已糖苷（ m / z 477.0313）；峰28、33和35为鞣花酸戊糖苷（ m / z 433.0415，）；峰36为鞣花酸（ m / z 300.9988）。
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鞣花酸的飘浮旅途为鞣花酸→UroD→UroC→UroB→UroA，UroA为最终代谢居品，在FY-CF中检测到3 种尿石素类化合物，证实张建伟的报说念，同期洽商质谱关所有据，不错推断出峰3、9和16为UroB过甚同分异构体（m/z 221.04，C13H8O3）；峰10为UroA（m/z 227.01，C13H8O4）；峰11、19、21和24为UroD过甚同分异构体（m/z 259.07，C13H8O6）。
由于胃肠消化及肠说念微生物对覆盆子单宁构成有显耀影响，如图9、表3所示，覆盆子单宁经胃模拟消化后，FGE组和FG组中的没食子酰基六羟基联苯二甲酰基葡萄糖、赤芍素/木麻黄鞣宁异构体、鞣花单宁及木麻黄鞣宁等8 种单宁类化合物的峰面积较FY组显耀增多，其中，鞣花酸滋生物、木麻黄鞣宁、鞣花单宁和鞣花酸已糖苷相对含量分离增多45.33%、19.16%、66.28%和53.03%，标明在胃消化经过中，覆盆子中可水解单宁的褂讪性受到消化酶和pH值的影响，但消化酶对其影响更小。经肠说念模拟消化后，FIE组和FI组的8 种单宁代谢物的峰面积较FGE、FG两组显然下落，比较FGE组，FIE中鞣花酸滋生物、鞣花单宁、鞣花酸戊糖苷以及没食子酰基六羟基联苯二甲酰基葡萄糖的相对含量分离下落67.48%、55.58%、78.32%和6.84%，可能是由于pH值环境的改造导致部分可水解单宁发生降解。
0路号码分析：上期走势一般，出现8个：03、06、27、30、33、60、63、78，最近10期0路号码出现71个，走势总体较热，其中冷温热期数比为0：6：4，0路号码大小个数比为39：32，大号表现明显较热，0路号码奇偶比为31：40，偶数号码表现活跃，与上期相比，本期预计0路号码个数减少，继续走温，关注7个：06、15、30、45、48、69、78。
百位分析：该位最近10期出现范围在0-8之间，波动了9个点位，波动范围较大，上期开出号码3，上升了3个点位，本期预计该位号码上升。另外该位最近10期大小比为5：5，相等，本期看好开出大号，参考号码7。
鞣花单宁在肠说念中被水解为鞣花酸，通异常去其中一个内酯和邻接去除羟基，鞣花酸进一步被结肠中的微生物飘浮成尿石素。通过对比母离子、碎屑离子的准确分子质料过甚特征碎屑模式，在FY-CF、FI-CF、FIE-CF样品中发现了尿石素，效劳如表3所示。在FY-CF中，不错检测出UroA、UroB、UroC以及UroD，而在FI-CF和FIE-CF中只检测到了UroA和UroB，何况其峰面积下落显耀，FI-CF、FIE-CF样品中UroA的峰面积分离下落53.37%和85.36%，而UroC和UroD的确莫得检出。综上，覆盆子单宁经胃肠说念模拟消化后，单宁含量在胃消化阶段会显然增多，肠消化阶段却显耀下落，标明胃肠说念消化经过会影响覆盆子单宁的褂讪性，使其含量显耀缩短。
结 论
通过有计划覆盆子单宁富集组分的体外模拟消化和结肠发酵特点发现，水解单宁含量经胃消化后显耀增多，肠消化后显耀缩短。胃和肠消化后，组分的DPPH摆脱基断根智力邻近，均显耀强于消化前，而ABTS阳离子摆脱基断根智力无显耀各异，胃消化样品的α-葡萄糖苷酶贬抑活性为消化前的7.16～7.86 倍，但经过肠消化后活性大大缩短。体外酵解有计划发现，覆盆子单宁可改造肠说念菌群的构成，促进Agathobacter、Bifidobacterium、Faecalibaterium、Blautia、Ruminococcus等潜在肠说念益生菌滋长，而胃肠消化后的覆盆子单宁对肠说念有意菌的滋长也有显然的促进作用。UPLC-ESI-QTOF-MS/MS浮滑发现，经过胃肠消化后，没食子酰基六羟基联苯二甲酰基葡萄糖、木麻黄鞣宁、鞣花酸等单宁类化合物的相对含量均呈先飞腾后下落的趋势，且结肠发酵后尿石素类化合物的飘浮率较低，仅检测到极少UroA和UroB，而UroC和UroD动作鞣花酸代谢经过的中间体未检测到。本有计划可为进一步构建覆盆子单宁稳态寄递体系，克服单宁本人的低飘浮率，提高单宁在体内或体外的生物期骗率提供表面依据。
本文《 覆盆子单宁富集组分消化褂讪性及对肠说念菌群的退换作用 》开始于《食物科学》2023年44卷第9期104-113页，作家： 贾晓燕，胡一又一又，王佩欣，丁 翘，汪恩惠，谢作桦，涂宗财 ，张 露 。 DOI:10.7506/spkx1002-6630-20220618-189 。 点击下方 阅读原文 即可检察著作相 关信息。
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